Karbapenemresistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Produktnavn
HWTS-OT045 Karbapenemresistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) Deteksjonssett (Fluorescens-PCR)
Epidemiologi
Karbapenemantibiotika er atypiske β-laktamantibiotika med det bredeste antibakterielle spekteret og sterkeste antibakterielle aktiviteten. På grunn av stabiliteten mot β-laktamase og lav toksisitet har det blitt et av de viktigste antibakterielle legemidlene for behandling av alvorlige bakterieinfeksjoner. Karbapenemer er svært stabile mot plasmidmedierte utvidede β-laktamaser (ESBL), kromosomer og plasmidmedierte cefalosporinaser (AmpC-enzymer).
Kanal
| PCR-blanding 1 | PCR-blanding 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Intern kontroll | Intern kontroll |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tekniske parametere
| Lagring | ≤-18 ℃ |
| Holdbarhet | 12 måneder |
| Prøvetype | Sputum, rene kolonier, rektalprøve |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0 % |
| LoD | 103CFU/ml |
| Spesifisitet | a) Kittet oppdager de standardiserte negative referansene fra selskapet, og resultatene oppfyller kravene til de tilsvarende referansene. b) Resultatene av kryssreaktivitetstesten viser at dette settet ikke har noen kryssreaksjon med andre respiratoriske patogener, som Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratorisk adenovirus, Enterococcus, eller prøver som inneholder andre medikamentresistente gener CTX, mecA, SME, SHV, TEM, osv. c) Anti-interferens: Mucin, minocyklin, gentamicin, clindamycin, imipenem, cefoperazon, meropenem, ciprofloksacinhydroklorid, levofloksacin, klavulansyre og roksitromycin er valgt ut for interferenstesten, og resultatene viser at de ovennevnte interfererende stoffene ikke har noen interfererende reaksjon på deteksjonen av karbapenemresistensgenene KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM og IMP. |
| Gjeldende instrumenter | Applied Biosystems 7500 sanntids-PCR-systemer QuantStudio®5 sanntids-PCR-systemer SLAN-96P sanntids-PCR-systemer (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 sanntids-PCR-system LineGene 9600 Plus sanntids-PCR-deteksjonssystem (FQD-96A，HangzhouBioteknologi) MA-6000 sanntids kvantitativ termisk sykler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 sanntids-PCR-system BioRad CFX Opus 96 sanntids-PCR-system |
Arbeidsflyt
Alternativ 1.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: Makro- og mikrotest General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (som kan brukes med Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) fra Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Tilsett 200 μL normal saltvann til thallusbunnfallet. De påfølgende trinnene bør følge instruksjonene for ekstraksjon, og det anbefalte elueringsvolumet er100 μL.
Alternativ 2.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: Nucleic Acid Extraction or Purification Reagent (YDP302) fra Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstraksjonen bør startes i strengt samsvar med trinn 2 i bruksanvisningen (tilsett 200 μL buffer GA til thallusbunnfallet, og rist til thallusen er fullstendig suspendert). Bruk RNase/DNase-fritt vann til eluering, og anbefalt elueringsvolum er 100 μL.
Alternativ 3.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: Makro- og mikrotestprøvefrigjøringsreagens. Sputumprøven må vaskes ved å tilsette 1 ml normal saltvann til det ovennevnte behandlede thallusbunnfallet, sentrifugeres ved 13000 o/min i 5 minutter, og supernatanten kastes (behold 10–20 µL supernatant). For ren koloni og rektal vattpinne, tilsett 50 μL prøvefrigjøringsreagens direkte til det ovennevnte behandlede thallusbunnfallet, og de påfølgende trinnene bør ekstraheres i henhold til bruksanvisningen.
