Karbapenem-resistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Produktnavn
HWTS-OT045 karbapenemresistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) deteksjonssett (fluorescens-PCR)
Epidemiologi
Karbapenemantibiotika er atypiske β-laktamantibiotika med det bredeste antibakterielle spekteret og sterkest antibakteriell aktivitet.På grunn av dets stabilitet overfor β-laktamase og lave toksisitet, har det blitt et av de viktigste antibakterielle legemidlene for behandling av alvorlige bakterielle infeksjoner.Karbapenemer er svært stabile overfor plasmidmedierte β-laktamaser med utvidet spektrum (ESBL), kromosomer og plasmidmedierte cefalosporinaser (AmpC-enzymer).
Kanal
PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/HEX | Indre kontroll | Indre kontroll |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Tekniske parametere
Oppbevaring | ≤-18 ℃ |
Holdbarhet | 12 måneder |
Prøvetype | Sputum, rene kolonier, rektal vattpinne |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0 % |
LoD | 103CFU/ml |
Spesifisitet | a) Settet oppdager de standardiserte selskapets negative referanser, og resultatene oppfyller kravene til de tilsvarende referansene. b) Resultatene av kryssreaktivitetstesten viser at dette settet ikke har noen kryssreaksjon med andre respiratoriske patogener, slik som Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratorisk adenovirus, Enterococcus, eller prøver som inneholder andre medikamentresistente gener CTX, SHV, T SHV, etc. c) Anti-interferens: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin er valgt for interferenstest, og resultatene viser at de ovennevnte interfererende stoffene ikke har noen forstyrrende reaksjoner til påvisning av karbapenemresistensgener KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM og IMP. |
Gjeldende instrumenter | Applied Biosystems 7500 sanntids PCR-systemer QuantStudio®5 PCR-systemer i sanntid SLAN-96P sanntids PCR-systemer (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 sanntids PCR-system LineGene 9600 Plus sanntids PCR-deteksjonssystem (FQD-96A,HangzhouBioer-teknologi) MA-6000 sanntids kvantitativ termisk syklus (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 sanntids PCR-system BioRad CFX Opus 96 sanntids PCR-system |
Arbeidsflyt
Valg 1.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: makro- og mikrotest generelt DNA/RNA-sett (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (som kan brukes med Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) av Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Tilsett 200μL vanlig saltvann til thallusutfellingen.Påfølgende trinn skal følge instruksjonene for ekstraksjon, og det anbefalte elueringsvolumet er100μL.
Alternativ 2.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: Nukleinsyreekstraksjon eller rensereagens (YDP302) av Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstraksjonen bør startes i henhold til trinn 2 i bruksanvisningen (tilsett 200μL buffer GA til thallus-bunnfallet , og rist til thallus er fullstendig suspendert).Bruk det RNase/DNase-frie vannet til eluering, og det anbefalte elueringsvolumet er 100 μL.
Alternativ 3.
Anbefalt ekstraksjonsreagens: Makro- og mikrotestprøvefrigjøringsreagens.Sputumprøven må vaskes ved å tilsette 1mL normal saltvann til det ovenfor nevnte behandlede thallus-utfellingen, sentrifugeres ved 13000r/min i 5 minutter, og supernatanten kastes (behold 10-20μL supernatant).For ren koloni og rektal vattpinne, tilsett 50 μL prøvefrigjøringsreagens direkte til det ovenfor nevnte behandlede thallusutfellingen, og de påfølgende trinnene bør ekstraheres i henhold til bruksanvisningen.